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大家都知道,細(xì)胞不斷地向細(xì)胞外空間分泌各種囊泡、大分子及小分子。至于分泌哪種類型的囊泡,這要看心情,哦不,要看細(xì)胞的來源以及它們目前的狀態(tài)。近年來,一種微型的囊泡正受到越來越多的關(guān)注,這就是exosomes,又稱外泌體。了解更多慧穎生物無外泌體血清Exosome-free FBS。
這種直徑在30至150 nm的小囊泡天然存在于各種體液中,包括血液、唾液、尿液以及母乳。它們像一輛輛小卡車,攜帶了精心安排的RNA和蛋白貨物,在許多生物過程中發(fā)揮了不同的作用和功能,比如抗原呈遞、程序性細(xì)胞死亡、血管生成和炎癥等。
其實(shí),在過去很長(zhǎng)一段時(shí)間內(nèi),exosomes一直坐在冷板凳上。人們認(rèn)為,那些貨物不過是些垃圾袋而已。幾年前,人們才意識(shí)到,exosomes實(shí)際上擔(dān)當(dāng)了真核細(xì)胞之間的通訊作用。核酸是帶電荷的分子,無法穿過細(xì)胞膜,于是這些囊泡為改變細(xì)胞的轉(zhuǎn)錄組助下一臂之力。
通俗地說,exosomes就像病毒一樣,將內(nèi)源的遺傳物質(zhì)從一個(gè)細(xì)胞傳遞到另一個(gè)細(xì)胞。以microRNA miR-451為例,腫瘤*地釋放miR-451,并將其裝入囊泡。當(dāng)周圍的細(xì)胞獲得這些囊泡,它們就收到了一堆轉(zhuǎn)錄本,使得細(xì)胞狀態(tài)更有利于腫瘤生長(zhǎng)和血管生成,從而促進(jìn)了腫瘤的發(fā)展。而這僅僅是一個(gè)分子。從整體上看,細(xì)胞中也有一個(gè)社交網(wǎng)絡(luò)。它們不斷交換囊泡,交流大量的信息。
至于細(xì)胞間交流了什么,這也是研究人員感興趣的地方。他們認(rèn)為,exosomes有望作為生物標(biāo)志物,用于疾病的診斷和治療。在此方面,exosomes又格外有吸引力,因?yàn)橥饨绲暮怂崦负偷鞍酌笩o法破壞它的貨物,囊泡內(nèi)的大分子在一段時(shí)間內(nèi)是穩(wěn)定的。
當(dāng)然,我們需要工具,來研究exosomes。幾年前,這方面的工具還相當(dāng)少。隨著exosomes研究熱潮的涌現(xiàn),如今我們的選擇也越來越多了
分離exosomes
對(duì)于許多研究而言,我們首先要分離出exosomes。經(jīng)典的方法是超速離心。具體操作是,首先以相對(duì)低的速度沉淀樣品,去除細(xì)胞碎片,然后逐步提高速度,zui終以100,000 x g離心1.5小時(shí),以沉淀exosomes。不過,這種方法耗時(shí)耗力,也很難標(biāo)準(zhǔn)化,因?yàn)楦鱾€(gè)實(shí)驗(yàn)室的轉(zhuǎn)子不同,離心條件不同。這就使得實(shí)驗(yàn)室之間的結(jié)果幾乎沒辦法比較。而且,并非每個(gè)實(shí)驗(yàn)室都能用上超速離心機(jī)。
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